2022产品推荐-乙酰辅酶A( Acetyl-CoA)含量检测试剂盒苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和NAD 生成草酰乙酸和NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶A和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应,乙酰辅酶A含量和NADH 的生成速率成正比,340nm 下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶A 含量的高低。
测定意义
乙酰辅酶A 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A 汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化,经过这条通路氧化生成二氧化碳和水,释放能量用于ATP 合成。此外,乙酰辅酶A 是合成脂肪酸,酮体,胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。
乙酰辅酶A 的提取
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万细菌或细胞加入1mL 试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
原创作者:南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司