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阅读次数:16151 发布时间:2016/4/18 20:41:39
组织芯片具有省时高效误差小等优点,自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。本文从组织芯片的特点、制备方法、制备过程、分类、优点、应用、研究分析等方面对这一技术进行介绍。组织芯片的概述
组织芯片(tissue chip),也称组织微阵列(tissue microarrays),是组织芯片是由生物芯片发展延伸而来的一种特殊的生物芯片技术,是生物芯片重要的组成部分,是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载玻片上,进行同一指标的原位组织学研究。
组织芯片技术是以形态学为基础的分子生物学新技术, 可以做常规病理学的HE 染色、各种免疫组织化学染色、组织化学染色、原位杂交、荧光原位杂交、原位PCR和原位RT-PCR 等, 可在同一张切片上高通量获得组织学、基因和蛋白的表达信息,这项技术的应用范围涵括了整个生命科学中各个基础研究、临床研究、应用研究以及药物开发的相关领域。
组织芯片的特点
1.体积小,信息含量大。
2.获得大量结果。
3.减少试验误差。
4.省时、省力、经济。
5.有利于原始蜡块的保存
组织芯片的制备方法
现在制备的多为石蜡标本组织芯片。但是石蜡包埋组织芯片也有它的局限性,它不能同时检测DNA、mRNA及蛋白质的改变,因为三者*佳固定条件不同,冷冻组织芯片可克服上述缺点但制作过程复杂,总体效果有待改进。另外,还可能存在一些无效组织、组织芯片的移位或脱落、假阳性或假阴性反应等问题。
制备过程:
①选取所需蜡块,常规切片做HE 染色,显微镜下确定目标区并做定位标记。
②采用组织打孔/ 阵列仪在受体蜡块上打孔,并精确排成微孔阵列。
③在做标记的蜡块上钻取组织柱,按设计方案移到受体蜡块上。
④把设计好的蜡块放入温箱,根据蜡质,调定温箱温度,在半融状态下取出,室温冷却,放入4 ℃冰箱中备用。
⑤借助特定切片辅助系统—粘着包被带卷片系统,对组织芯片蜡块连续切片。切片厚度2~ 3μm ,一般可切片50~100 张。
组织芯片的分类
常见的分类方法:
①根据一张芯片上样本含量的多少分为
低密度芯片( < 200 点)
中密度芯片(200~600点)
高密度芯片( > 600 点)
目前上常用的TMA的标本量多为60-100个,组织片的直径在2mm左右。一般情况下,在直径2mm的组织片上有约100000个细胞,而直径0.6mm的组织片上仅有约30000个细胞
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