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谷胺酰胺合成酶(GS)试剂盒强势来袭

阅读次数 :16036    发布时间 :2017/3/15 19:26:16

 谷胺酰胺合成酶(GS)试剂盒基本信息

产品名称 :谷氨酰胺合成酶(GS)检测试剂盒

英文简称GS

检测方法可见分光光度法

产品规格 :50/24

保存与运输:28

应用范围:科研用检测试剂

谷氨酰胺合成酶(GS)检测试剂盒植物组织匀浆的制备

 

1、取组织块(0.2g0.5g)*少可到510mg在冰冷的PBS中漂洗 ,滤纸拭干 ,准确称重 ,放入5ml的匀浆管中 。

2、按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块 。

3、匀浆的方式 :手工匀浆 ,机器匀浆 。

① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(68分钟) ,充分研碎,制成20%的匀浆液。

② 机器匀浆:用组织捣碎机1000015000 /分 上下研磨制成20%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10/次,间隙30秒 ,连续35次,在冰水中进行,可适当延长匀浆时间),

镜检观察:取少量组织匀浆作涂片(直接涂片 、染色均可以),显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。

4 、将制备好的20%匀浆液用普通或低温低速离心机4000/分左右,离心1015分钟 ,取上清液进行测定.

谷氨酰胺合成酶(GS)检测试剂盒

谷胺酰胺合成酶(GS)试剂盒动物组织匀浆的制备 :

1、取组织块(0.1g0.2g)*少可到25mg在冰冷的盐水中漂洗,除去血液 ,滤纸拭干,准确称重 ,放入5ml的匀浆管中。

2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(pH7.4 , 0.01mol/L Tris-HCl ,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的溶液)或者0.86%的盐水于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。

3、匀浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超声粉碎。

① 手工匀浆 :左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中 ,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(68分钟) ,充分研碎,制成10%的匀浆液 。

② 机器匀浆 :用组织捣碎机1000015000 /分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10/次 ,间隙30秒,连续35次 ,在冰水中进行) ,皮肤 、肌肉组织等可延长匀浆时间 。

③ 超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎 ,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎 ,也可用国产超声波发生仪,用400安培,5/次,间隙10秒反复35次 。

4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500/分左右,离心1015分钟 ,取上清液进行测定.

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