糖原PAS快速染色液的操作方法与注意事项

阅读次数：16036 发布时间：2019/5/14 15:25:37

糖原染色是病理学中常规的染色方法，McManus在1946年使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，改染色试剂盒不仅能显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸（又称高碘酸）是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的12-乙二醇基，使之变为二醛，醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色、由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质。使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。
操作步骤
1、常规固定，常采用10%的福尔马林，常规脱水包埋。

2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水；冰冻切片直接入蒸馏水。 3、自来水冲洗2-3min，再用蒸馏水浸洗2次。 4、入过碘酸溶液，室温放置5-8min一般不宜超过10min。

5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入Schiff Reagent，置于室温阴暗处浸染10-20min。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液，染细胞核1-2min。9、酸性乙醇分化液分化2-5s。10、自来水冲洗10-15min更换蒸馏水清洗，使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。

注意事项
1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。
2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18-22℃。
3、过碘酸溶液和Schiff Reagent应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多阳光和空气。使用前，提前30min取出恢复到在室温，避光暗处使用。
4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的分别和分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
5、在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄，组织的类别等决定。
6、本染色液常用于常规组织切片染色，对于真菌，细胞，及其薄的切片，建议采购糖原PASr染色试剂盒（细胞真菌专用），因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低，不宜过染。
7、冷冻切片染色时间尽量要短。8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作，

原创作者：南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司

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