多聚甲醛固定细胞的原理

阅读次数：15905 发布时间：2023/8/9 14:37:12

多聚甲醛固定细胞的原理

多聚甲醛固定细胞时，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联，形成一网状结构，把细胞的各个结构成分连接起来。但单独用多聚甲醛固定细胞不能使抗体进入细胞内，因此，标本经固定后必须用非离子去污剂透化标本。商业甲醛溶液不能用于细胞染色固定，因为其不具有多聚甲醛固定细胞的优点，且细胞会被甲醇固定。

固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固，终止内源性或外源性酶反应，防止组织自溶或异溶，以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活或弥散。固定液种类很多，常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。其固定原理不同，各有优缺点。目前在科学研究中多聚甲醛应用*广，通过形成分子间的交联从而使细胞或组织的三维结构得以被固定。多聚甲醛是甲醛的聚合物，性质比甲醛稳定，且对抗原的破坏能力弱于甲醛，因此，科学研究中常用多聚甲醛作为固定剂。

4%多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化、免疫荧光(Immunofluorescence, IF)、免疫细胞化学、流式分析等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。本产品配制在PBS溶液中，可直接用于组织或细胞的固定，无需稀释。若需使用低浓度多聚甲醛，可使用PBS按比例稀释。

使用注意事项：

1、多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响染色。
2、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
3、多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。
4、多聚甲醛可存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。
5、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
6、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。