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技术文献

牛肠激酶 Enterokinase 使用介绍

阅读次数:15501    发布时间:2023/8/23 15:16:31

 牛肠激酶 Enterokinase  使用介绍

其它名称 :重组牛肠激酶(r-EK

来源:大肠杆菌

产品形式:液体

体系:50 mM Tris-HCl 、50%甘油、pH8.0

比活性 :≥40 KIU/mg

浓度:1U/ul

分子量:26.2 kDa

等电点:5.20

纯度 :≥95%SDS-PAGE 检测)

活性单位定义:于25℃,反应缓冲液为50 mM Tris-HClpH8.0),16小时切割50ug1mg/ml)融合蛋白达95%以上所需要的酶量,定义为个活性单位U。(注 :或在37℃ ,16小时内将500ugThioredoxin-NP-27 95%降解为NP-27所需要的酶量,定义为个活性单位U

规格 :200U 、1000U 、4000U

保存 :-20℃

相关介绍:

肠激酶是一种丝氨酸蛋白水解酶,能专一地识别蛋白质中Asp-Asp-Asp-Asp-LDDDDK)序列,并在赖氨酸(Lys,K)的端水解肽键,产生切割 。肠激酶具有的高度专一性和酶切特性使其被广泛应用于基因工程产品的开发。天然肠激酶由115 kDa 的重链和35 kDa 的轻链组成 ,重链起锚定细胞膜的作用,轻链具有全酶完整的催化活性。本产品采用大肠杆菌分泌表达牛肠激酶的轻链活性核心区域(235A.A., 26.2 kDa),比活性更高,特别适用于基因工程融合蛋白的酶切 ,且专为切割重组表达融合蛋白需要而设计,含有His-6重组标签 ,适合于Ni-亲和层析柱的不同分离纯化方式 。

注意事项 :

1)肠激酶的活性影响成分:如>2 M Urea,>250 mM NaCl ,>20 mM β-ME ,>0.1% SDS,>50mM Imidazole。样品中如果含有这些成分,需要透析至50 mM Tris-HClpH8.0)。

2)磷酸盐会抑制肠激酶的活性 ,应避免使用磷酸盐缓冲液作为酶切体系 。

 

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