石蜡切片的使用及原理！
石蜡切片是组织学常规制片技术中*为广泛应用的方法。不仅用于观察正常细胞组织的形态结构 ，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。
石蜡切片法包括取材 、固定 、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋 、切片与贴片、脱蜡、染色 、脱水、透明、封片等步骤 。
1.取材
应根据要求选取材料来源及部位 。
2.固定
用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜材料，迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化 ，尽可能保持其活体时的结构。固定能使组织硬化，有利于切片的进行，而且也有媒浸作用，有利于组织着色 。
3.洗涤与脱水
固定后的组织材料需除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀，否则会影响后期的染色效果。
4.透明
纯酒精不能与石蜡相溶，还需用能与酒精和石蜡相溶的媒浸液 ，替换出组织内的酒精。透明剂的浸渍时间则要根据组织材料块大小及属于囊腔抑或实质器官而定。如果透明时间过短，则透明不澈底 ，石蜡难于浸入组织；透明时间过长 ，则组织硬化变脆 ，就不易切出完整切片，*长为数小时。
5.浸蜡与包埋
石蜡熔化后应在蜡箱内过滤后使用 ，以免因含杂质而影响切片质量，且可能损伤切片刀。通常石蜡采用熔点为56～58℃或60～62℃两种 ，可根据季节及操作环境温度来选用。
6.切片
包埋好的蜡块用刀片修成规整的四棱台，以少许热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上 ，夹在轮转式切片机的蜡块钳内 ，使蜡块切面与切片刀刃平行，旋紧。
7.贴片与烤片
用粘附剂将展平的蜡片牢附于载玻片上，以免在以后的脱蜡 、水化及染色等步骤中二者滑脱开。
8.切片脱蜡及水化
干燥后的切片需脱蜡及水化才能在水溶性染液中进行染色。用二甲苯脱蜡 ，再逐级经纯酒精及梯度酒精直至蒸馏水。如果染料配制于酒精中，则将切片移至与酒精近似浓度时 ，即可染色。
9.染色
染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察 。经染色可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不同类型的细胞组织。原创作者：南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物技术有限公司
