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大鼠Ⅰ型胶原 C 端肽(CTX-Ⅰ)检测原理!

阅读次数:15836    发布时间:2022/2/14 15:47:49

 大鼠Ⅰ型胶原 C 端肽(CTX-Ⅰ)检测原理 !
产品名称:大鼠Ⅰ型胶原 C 端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒
产品规格:96T
储存条件 :2-8℃,避光防潮保存
有效期:6个月
检测原理:试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA) 。往预先包被大鼠型胶原C端肽(CTX-)捕获抗体的包被微孔中,依次 加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并澈底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠型胶原C端肽(CTX-)呈正相关 。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度 。
实验步骤(仅供参考):
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃ 。
2. 设置标准品孔和样本孔 ,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL ;
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL ,再加样本稀释液 40μL ;
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min 。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干 ,每孔加满洗涤液 ,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板) 。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min 。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的OD 值 。
注意事项:
1.试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟 。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶 ,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中 ,密封(低温干燥)保存 。
3. 预处理后的样本无需稀释,直接取 10μL 加样即可。 
4. 严格按照说明书中标明的时间 、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6.本产品仅供科研实验用,不做其它用途 。

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