南京5357cc拉斯维加斯首页入口客户订购gibco胰酶试剂案例 ，品牌：Life Technologies Gibco，产品名称：Trypsin-EDTA (0.05%), phenol red，适应细胞类型：细胞表面蛋白的完整性很重要的连续细胞系。 对于原代角质细胞来说,随着胰酶浓度的增加,作用时间的延长,贴壁率都降低 。在相同的作用时间下,用0.05%的胰酶消化皮肤组织特别有利于原代角质细胞的贴壁,不论作用时间长短, 0.05%浓度的胰酶消化得到的角质细胞的贴壁率都明显高于其它几组。结合细胞活性实验结果,发现角质细胞的活性越高,细胞的贴壁率也就越大 。当用0.05%胰酶作用5min时得到了原代角质细胞的贴壁率45%,其余均为20%~40%,这与文献报道的人角质细胞贴壁率32%接近 。
胰酶对原代角质细胞克隆形成率的影响是不规则的,但总体而言,消化时间长克隆形成率相对较高,各种胰酶浓度下获得克隆形成率的消化时间不同,但都小于1%,这和文献报道的原代人角质细胞克隆形成率小于1%是吻合的。然而对于每平方厘米皮肤组织所能获得的有克隆形成能力的角质细胞量而言,发现在0.25%胰酶浓度下作用5min时达到值1292个cm2 skin 。人角质细胞在胰酶中停留过长时间容易造成 低的贴壁率,并且容易导致分化。虽然在0.05%的胰酶作用25min时得到的有克隆形成能力的原代角质细胞数和0.25%的胰酶作用5min时相近,但考虑到以后的培养和防止细胞分化,采用0.25%的胰酶 作用5min分离原代角质细胞较为适宜。随着胰酶浓度的增加,消化传代角质细胞所获得的克隆形成率略有增加，因此可以推测能够形成克隆的细胞是尚未分化的干细胞,而胰酶浓度低、作用时间长容易使 角质细胞分化,所以会造成低的克隆形成率。
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