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阅读次数：1199 发布时间 ：2017/11/17 19:15:41
丙二醛(MDA)试剂盒基本信息丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标 ，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3 ，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中*主要的是可溶性糖 ，糖与TBA显色反应产物的吸收波长在450nm ，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值 ，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子 ，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1 。
丙二醛(MDA)试剂盒检测技术简介
测定意义：
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合
物，其中包括MDA 。通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平 。
测定原理：
MDA 与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合 ，生成红色产物 ，在532nm 有吸收
峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定600nm 下的吸光度，利用532nm
与600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板 、
研钵 、冰和蒸馏水 。
试剂的组成和配置 ：
提取液：液体100mL×1 瓶，4℃保存 ；
试剂一：液体30mL×1 瓶，4℃保存；
注意事项 ：
临用前注意试剂一是否完全溶解 ，如未溶解，可以70℃加热，并振荡以促进溶解 。
MDA 提取：
1 、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个） ：提取液体积（mL）为500~1000 ：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 提
取液） ，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s ，间隔10s ，重复30 次）；
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测 。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，
加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测 。
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