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无机磷检测试剂盒(硫酸亚铁钼蓝微板法)
产品简介：
血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4
-和HPO4
2-两种磷酸根阴离子
组成，上述阴离子在在丌同的 pH 环境下能快速相互转换 。在 pH7.4 血清中 ，二者浓度比
例为 1:4；在酸中毒环境下二者浓度约为 1:1；在碱中毒环境下二者浓度比例为 1:9；在 pH4.5
尿液中浓度比例为 100:1。WHO 推荐的常规检测方法为比色法 ，我国卫生部临检中心推荐
的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法。
无机磷检测试剂盒(硫酸亚铁钼蓝微板法)是先经硫酸亚铁提纯蛋白，利用无机
磷不钼酸铵结合生成磷钼酸铵，后者被硫酸亚铁还原成蓝紫色的复合物，通过酶标仪检测
640nm 处吸光度值，根据公式计算出无机磷含量 。本试剂盒仅用于科研领域 ，丌宜用于临
床诊断戒其他用途。
产品组成：
自备材料：
1、EP 管
2、
3、酶标仪
无机磷检测试剂盒，现货供应
操作步骤(仅供参考)：
1、(选做)制备样品：
①血浆、血清样品：取 0.02ml 待测血浆、血清样品 ，加入 0.48ml Pi Assay buffer，
充分混匀，室温静置 10min ，3000g 离心 10min，取上清 ，-20℃冻存 ，用于 Pi
的检测。
②尿液样品：取适量的待测尿液，用 50%的盐酸调 pH 至 6.0。用蒸馏水做 1:10-1:20
稀释。取 0.02ml 稀释后的尿液样品，加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混匀，室
温静置 10min ，3000g 离心 10min，取上清 ，-20℃冻存，用于 Pi 的检测。
编号
名称
100T Storage
试剂(A): 磷标准(1mg/ml) 1ml 4℃
试剂(B): 标准品稀释液 10ml 4℃ 避光
试剂(C): Pi Assay buffer 80ml 4℃ 避光
试剂(D): 硫酸亚铁钼蓝显色液 3ml 4℃ 避光
使用说明书 1 份
③细胞戒组织样品 ：取恰当细胞戒组织进行匀浆，低速离心取上清。取 0.02ml 匀浆
样品 ，加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混匀 ，室温静置 10min，3000g 离心
10min，取上清，-20℃冻存，用于 Pi 的检测 。
④高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的 Pi，可以使用去离子水稀释。
⑤(选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度 ，以便于后续
计算单位蛋白重量组织戒细胞内的 Pi 含量 。
2、制备磷标准工作液 ：取适量的磷标准(1mg/ml) ，按磷标准(1mg/ml)：标准品稀释液
=1:24 的比例稀释，即获得磷标准(1.292mmol/L) 。取 0.02ml 磷标准(1.292mmol/L) ，
加入 0.48ml Pi Assay buffer ，充分混匀 ，室温静置 10min，3000g 离心 10min，取
上清，即为磷酸标准工作液，-20℃冻存，用于 Pi 的检测。
3 、Pi 检测：按下表操作 。
4、混匀 ，室温静置 15min，酶标仪 640nm 处检测 ，以空白管调零，读取各管吸光度值。
计算 ：
血清、血浆中无机磷计算公式 ：磷(mmol/L)=(A 测定/A 标准)×1.292
尿液中无机磷计算公式：磷(mmol/d)=(A 测定/A 标准)×1.292×N×24h 尿量(L)
组织中磷计算公式：磷(mmol/mg)=(A 测定/A 标准)×1.292/待测样品蛋白浓度(mg/L)
式中 ：A 测定=待测管的吸光度值
A 标准=标准管的吸光度值
N=尿液稀释倍数
单位换算：mg/dl=mmol/L/0.323
参考区间 ：健康成年人血清磷浓度 ：0.96~1.62mmol/L(3~5mg/dl)
儿童血清磷浓度 ：1.45~2.1mmol/L(4.5~6.5mg/dl)
注意事项 ：
1、 溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。
2 、 本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。
加入物(μl) 空白管 标准管 测定管
Pi Assay buffer 200 — —
磷标准工作液 — 200 —
处理后的待测上清液 — — 200
钼蓝显色液 25 25 25
3、 如果样品浓度过高 ，应用蒸馏水稀释后重测 ，结果乘以稀释倍数 。
有效期 ： 12 个月有效。
无机磷检测试剂盒，现货供应
