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阅读次数：1815 发布时间 ：2018/1/26 14:47:48
南京5357cc拉斯维加斯首页入口生物 促肾上腺皮质激素，ATCH放免试剂盒现货供应 。同时提供放免实验检测服务，欢迎大家来电咨询 ！
一、概述及临床意义
ACTH是由垂体前叶细胞分泌的39个氨基酸组成的直链多肽，分子量4500 ，在循环中的半衰期仅为10~25min。ACTH的生理作用为促进肾上腺皮质增生、合成和分泌皮质类固醇，同时也促时肾上腺素、生长激素合成。ACTH的合成和分泌受下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH) 、肾上腺皮质激素以及加压素的调节。5357cc拉斯维加斯首页入口利用ACTH的18~39片段的特异抗体，建立了特异、灵敏的测定血浆 、体液中ACTH18-39片段的放射免疫分析方法 。该抗体也能同组织、细胞切片中特异的ACTH和体外纯化的ACTH特异结合 ，用于临床组织化学诊断ACTH水平变化。因此该方法适用于肾上腺皮质功能亢进、异位ACTH综合征、肾上腺腺瘤上腺皮质功能减退等诸多临床疾病时血浆ACTH水平的监测。
二、测定原理
应用竞争机制原理，标准或样品中的ACTH和加入的125I- ACTH 共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125I -ACTH与抗体的结合量与标准或样品中ACTH的含量呈一定的函数关系 。用免疫分离试剂（P.R.）
将结合部分（B）与游离部分（F）分离后 ，测定结合部分的放射性强度，
并计算相应结合率B/B0。用已知标准ACTH含量与对应结合率作图，即得
标准抑制曲线。从标准曲线上查出对应结合率的待测样品中的含量 。
三、试剂盒组成
| 规格 组份 | 100管 | 50管 | 制品状态 |
| 1）ACTH标准品（S0-S5） | 6瓶 | 6瓶 | 固 体 |
| 2）125I- ACTH（红色） | 1瓶 | 1瓶 | 固 体 |
| 3）兔抗-ACTH抗血清（兰色） | 1瓶 | 1瓶 | 固 体 |
| 4）驴抗兔免疫分离剂 | 1瓶/55ml | 1瓶/28ml | 液 体 |
| 5）ACTH缓冲液（无色） | 1瓶/25ml | 1瓶/25ml | 液 体 |
| 6）EDTANa2 10% | 1瓶/3ml | 1瓶/3ml | 液 体 |
四 、试剂的配制、使用方法和保存
1． 标准ACTH 溶液 ：使用前用缓冲液1ml溶解，混匀。2~8℃避光保存 ，在标识的有效期内稳定，浓度分别为0、5 、15、45、135、405pg/ml。
2． 125I- ACTH溶液：使用前用缓冲液(100管10.5ml溶解，50管5.5ml
溶解)，混匀 。如一次加样超过100管，两瓶混合后使用 ；2~8℃避光保存标识的有效期内稳定 。
3． 兔抗-ACTH 抗血清：使用前用缓冲液(100管10.5ml溶解，50管5.5ml
溶解)，混匀。如一次加样超过100管 ，两瓶混合后使用；2~8℃避光保存标识的有效期内稳定。
4． 驴抗兔免疫分离试剂 ：1瓶，液体 ，2~8℃保存，在标识的有效期内稳定。加样前必须摇匀！
五、 样本处理
取静脉血2ml ，注入含10%EDTA二钠30ul的试管中，混匀4℃,3000rpm离心10 min,分离血浆 ，待测；如不立即测量 ，可将样本密封后，置于2~8℃或-20℃储存备测 ，2~8℃保存不应超过48小时，-20℃保存不超过2个月 。冰冻样品测定前 ，使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃,3000rpm离心5 min,取上清测定 。
六、 测定步骤
取圆底聚苯乙烯试管若干，用记号笔或特殊铅笔编号NSB ，S0—S6和待测样品管等 ，然后用微量取样器按下表加样。
操作程序表 （单位：μl）
| 管别 试剂 | NSB | S0 | S1—S5 | 待测 样品管 |
| 缓冲液 | 200 | - | — | — |
| ACTH 标准品 | — | 100 | 100 | — |
| 待测样品或质控 | — | — | — | 100 |
| 125I- ACTH | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 兔抗-ACTH 抗血清 | — | 100 | 100 | 100 |
| 混匀 ，任取三管测总T，4℃温育18小时以上 | ||||
| 驴抗兔免疫分离试剂 | 500 | 500 | 500 | 500 |
| 充分摇匀后，室温放置15分钟，3500转/分钟离心15分钟，吸弃上清，测各沉淀管的放射性计数(cpm) 。 | ||||
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七、 数据处理
1. 联机处理:由电脑自动处理得出结果 。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同 ，处理软件也不一样，用户一定要使用适合的处理
软件进行数据处理 。在此建议用户使用logit-log或四参数数据处理模式 。
2. 手工作图或计算器处理:
1).百分结合率计算：设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B ，非特异管计数为NSB，则百分结合率计算公式如下：B/ B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100%
2).logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式如下:
logit=ln(B/ B0)/(1－B/ B0)
3)手工作图：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标，对应的B/B0为纵坐标在logit-log坐标纸上画出标准曲线（理想化时是一条直线）。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意 ：如果使用普通坐标纸 ，查出的数值应取反对数才是*后的浓度值。
4).计算器处理；使用有线性拟合功能的计算器，可以比较方便地计算出样品浓度值，具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。如果用户需要可以和北方所联系，5357cc拉斯维加斯首页入口可以向您提供使用方法。
标准曲线举例（仅供参考，不得用于实际计算）。
| 项目 | B/T | B/B0（浓度单位pg/ml） | ||||||
| NSB | 零标准 | 5 | 15 | 45 | 135 | 405 |
| |
| % | 2.5 | 45 | 91 | 74 | 56 | 32 | 14 |
|
八 、 本测定盒主要技术指标
1． 标准范围：5—405pg/ml
2． 灵敏度 ：<5pg/ml
3． 批内变异系数（CV） ：<10%;
批间变异系数（CV） ：<15%
4． 使用期限 ：见产品外包装 。
九、 参考正常值 ：
a) 测定本所工作人员20例(21-45岁)早8：00血浆中ACTH浓度为7.9-32.1pg/ml均值17.3±5.73pg/ml;下午16：00血浆中ACTH浓度为10.7-30.5pg/ml，均值18.4±5.6pg/ml 。
b) 测定门诊查体人群202例(14-76岁)，早晨空腹血清中ACTH
浓度为5.08-32.86pg/ml,均值14.56±6.22pg/ml 。
由于地区及使用不同,所测的正常值会存在一定的差异,所以本说明书提供的正常值仅作参考.各实验室能建立符合本实验室要求的正常值范围。
十、 注意事项
1） 收到试剂盒后，尽快存放在2~8℃；冻干品溶解后，应保存在2~8℃条件下 ，不要反复冻融 。
2） 125I- ACTH一次使用不完时 ，可先用少量缓冲液溶解，分成若干支 ，-20℃保存，一次使用一支。
3） 实验前全部试剂应放置室温下平衡 。
4） 本产品组份分为两类 ，即液体组份、 冻干组份。液体组份标签上的有效期是指未开盖、开封时当储存条件符合标签要求时的有效期限 ，但开盖开封后的有效期*多为45天（具体期限见本产品说明书有关说明）； 冻干组份标签上的储存条件是指复溶后应采用的储存条件 ，而有效期是指未复溶条件下当储存条件符合标签时的有效期限，复溶后的有效期限在标签规定的储存条件下*多为45天（具体期限见本产品说明书有关说明）。
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