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阅读次数:923 发布时间:2020/7/13 15:49:25
原来同位素标记运用这么广泛,让人惊讶!
同位素标记法是利用放射性同位素作为示踪剂对研究对象进行标记的微量分析方法,生物学中常用的放射性同位素(原子核不稳定会发生衰变,发出α射线或β射线或γ射线的同位素)有3H、14C、32P、35S、45Ca、51Cr、59Fe、125I、131I、198Ag等,稳定性同位素(原子核结构稳定,不会发生衰变的同位素)有2H、13C、15N、18O等。
同位素标记 (同位素内标)较于其同种元素的未标物具有质子数相同中子数变化的特点,通过用同位素取代特定原子来标记反应物,然后使反应物进行反应,并检测中子数变化的原子,可通过反应、代谢途径或细胞跟踪同位素。
同位素内标物与对应的未标物理化性质相似,通过光吸收和免疫的方法无法区分,在色谱中如果将同位素内标物与对应的未标物用同样的检测方法,其保留时间也几乎一致,无法分辨。
稳定性同位素内标是质谱方法即稳定性同位素稀释法独有的,在质谱(Mass)中,如果加进同位素内标,那测出来的值较未标物有很大的差值,质谱能把同位素内标和要检测的物质区分开。
5357cc拉斯维加斯首页入口生物可供多种稳定同位素标记的内标,包括2H (氘标 D) 、13C、15N、17O、18O、34S等,放射性的同位素内标具有较大的伤害性,一般稳定性同位素可以完成的建议优选稳定性同位素内标物,若被检测物是稳定同位素内标物对应的未标物,那么,较被检测物而言,对应的同位素标记物只是将部分氢原子(1H)、碳原子(12C)或氮原子(14N)等被2H (氘、D)、13C、15N所取代,被检测物与对应的稳定同位素内标物理化性质基本一致,尤其在色谱中,几乎无法区分。
同样是稳定同位素标记,13C、15N相对来说比2H(氘标) 更好,所以氘标(D、2H)一般也相对而言更便宜,色谱定量中,2H、13C、15N标记的差别不大,如果需要质谱(MS)或者核磁(NMR)定量,一般建议优选13C或者15N标记。
目前同位素内标广泛应用于检测中:包括维生素检测、胆汁酸检测、激素检测、儿茶酚胺检测等。
原来同位素标记运用这么广泛,让人惊讶!