UNG酶（温度敏感型)来源于低温微生物大肠杆菌

阅读次数：991 发布时间：2020/7/22 11:51:58

UNG酶（温度敏感型)来源于低温微生物大肠杆菌

产品介绍:
TS-UNG（Temperature Sensitive UNG）是经大肠杆菌重组表达获得的温度敏感型 UNG 酶。该酶能够催化含尿嘧啶的单链和双链 DNA 释放游离尿嘧啶，对 RNA 无活性，主要应用于 PCR 扩增中防止产物污染。

TS-UNG 酶与 E.coil 基因来源的常规 UNG 酶相比，对温度敏感、易于灭活，避免了常规 UNG 酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含 dUTP 扩增产物的降解作用。TS-UNG 酶可以在 20℃~37℃，5~10min 反应，以消化含 dUTP 的模板；然后，在 50℃ 10min 或 95℃ 2min 进行灭活。利用 TS-UNG 酶低温消化、易于灭活的特性，它可以很好地与 RT-PCR 扩增反应程序相匹配，从而应用于反转录扩增防止产物污染。

活性定义：
37℃条件下，1 小时降解 1µg 含 dU 碱基的单链 DNA 的酶量为 1 单位。

质量控制：
1、 SDS-PAGE 电泳纯度大于 98%；
2、降解活性、批间差异、稳定性；
3、无核酸外切酶和核酸内切酶活性、RNase 酶活性；

注意事项:
1、在 20℃~37℃范围内，TS-UNG 酶的活性随温度的升高有所增加，常用 20℃、25℃、37℃进行反应，可对酶的用量（0.1~0.5U）及反应时间（5~10min）进行优化；特别适合 RT- PCR 防污染使用； 2、由于不同待扩增基因对 dUTP 的利用效率和对 UNG 酶的敏感度不同，因此，如果采用 UNG 体系导致检测灵敏度下降，应对反应体系进行调整优化；
3、避免多次冻融，切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有较大影响；
4、扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR 反应完成后切勿打开反应管。以限度的减少 PCR 产物对样品的污染。

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