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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶检测服务，磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶试剂盒

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶检测服务，磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶试剂盒

点击次数：178    发布时间：2019/10/15 16:43:18

产品目录
农残检测试剂
生物试剂
化学溶液
标准物质 溶液
科研放免试剂盒
生化试剂盒
科研ELISA试剂盒
人ELISA试剂盒
小鼠ELISA试剂盒
大鼠ELISA试剂盒
豚鼠ELISA试剂盒
兔子ELISA试剂盒
猪ELISA试剂盒
其他ELISA试剂盒
二抗
科研质控品 标准菌株
标准品
生化实验检测服务
干扰物质
科研血清
高品质试剂
蛋白研究相关试剂
科研SLB相关试剂
明胶酶谱法试剂盒
PCR引物合成服务
引物合成
引物设计
免疫组化实验代做
Western blot实验代做
实时荧光定量PCR实验代测
生化试剂LG
详细内容

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶检测服务  ，磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶试剂盒

本产品仅供科研实验 ，不得用于医疗或食用 。测定意义：PEPCK（EC 4.1.1.32）广泛存在于动物 、植物 、微生物和细胞中，催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸 ，是调节糖异生途径的关键酶
测定原理 ：PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PEPCK活性
自备实验用品及：自备实验用品及仪器： 
分光光度计/酶标仪、台式 、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵 、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配置：提取液 ：液体100mL×1瓶，4℃保存； 试剂一：液体18 mL×1瓶， 4℃保存 ；  试剂二：液体16.5uL×1支，4℃保存； 试剂三：粉剂×1支 ， -20℃保存； 试剂四：粉剂×1支，-20℃保存；
样本前的处理：1 、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000 ：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测 。 2、组织 ：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 3、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤 ：1 、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。 
2 、工作液的配制：临用前将试剂二和试剂三转移到试剂一中混合溶解待用 ；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。 
3 、试剂四的配制：临用前加入1mL蒸馏水充分溶解待用 ；用不完的试剂分装后-20℃保存 ，禁止反复冻融 。 
4、将工作液和试剂四置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热5分钟 。 
5 、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、10μL试剂四和180μL工作液，立即混匀 ，记录340nm处初始吸光值A1和 1min后的吸光值A2 ，计算ΔA=A1-A2。 
注意：在该试剂盒中 ，若ΔA大于0.1 ，需将样本用提取液稀释适当倍数后测定，使ΔA小于0.1可提高检测灵敏度。计算公式中乘以相应稀释倍数。

更新时间：2024/12/11 17:30:52

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