海藻糖含量检测试剂盒说明书
产品内容：
提取液：液体100ml×1 瓶 ，4℃保存；
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存 ；
标准品 ：粉剂×1 支，含10mg 海藻糖。
产品简介：
海藻糖存在于大量有机体中，包括细菌、藻类、酵母、植物、昆虫和其他无脊椎动物。由于海
藻糖具有独特的不同于其他碳水化合物的生物学特性 ，能在干旱 、高温 、脱水、冷冻、高渗透压及
毒性物质等恶劣环境下保护生物体细胞蛋白质 、脂肪、糖类 、核酸等组分不受损害 。
测定方法采用蒽酮比色法。具有简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。但是蒽酮比色法也
存在一定缺陷 ，如果样本中含有可溶性糖 ，则会影响测定 。本试剂盒建议用于除海藻糖外不含其他
可溶性糖样本的测定 。
操作步骤 ：
一 、海藻糖提取 ：
1、细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500 万细菌或细胞加入
1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％或200w，超声3 秒 ，间隔10 秒，重复30 次），
室温静置45min，振荡3~5 次 ，冷却后，8000g ，常温离心10min，取上清。
2 、组织的处理：称取约0.1g 样本 ，加入1mL 提取液，冰浴匀浆或研碎，室温静置45min ，振荡3~5
次 ，冷却后，8000g，常温离心10min，取上清 。
3 、血清（浆）的处理：吸取约100μL 血清（浆），加入1mL 提取液，充分混匀 ，室温静置45min ，
振荡3~5 次，冷却后，8000g ，常温离心 ，取上清。
4、标准品的处理：标准品用1ml 双蒸水溶解 ，溶液浓度为10mg/ml，稀释到0.1、0.08 、0.06、0.04 、
0.02、0mg/ml。
二、测定操作表 ：
1 、分光光度计或酶标仪预热30min，波长调节至620nm，蒸馏水调零。调节水浴锅至95℃。
2、工作液的配制 ：临用前在每瓶试剂一中加入7mL 蒸馏水后，缓慢加入28mL 浓硫酸 ，不断搅拌，
充分溶解 ，待用。用不完的试剂4℃保存一周。
3、标准曲线的建立：取60l 标准液和240l 现配的工作液混匀，95℃水浴10 min ，（盖紧，防止
水分散失）自然冷却至室温，取200l 至比色皿或酶标板中，在620nm 处测吸光值A。根据标
准样本的浓度（y）和吸光度（x）建立标准曲线。
4、样本测定：取60l 样本和240l 现配的工作液混匀，95℃水浴10 min，（盖紧，防止水分散失）
自然冷却至室温，取200l 至比色皿或酶标板中 ，在620 nm 波长下测定吸光度值为A。
若吸光值大于1，请将样本用提取液适当稀释 。*后计算时乘以相应的稀释倍数。
