5357cc拉斯维加斯首页入口生物低价销售多酚氧化酶

阅读次数：15834 发布时间：2019/11/7 9:47:47

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测定意义：

PPO（EC1.10.3.1）主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化产生醌，从而引起褐化，与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。

测定原理：

PPO能够催化邻苯二酚产生醌，后者在525nm有特征光吸收。

需自备的和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液×1瓶，4℃保存；

试剂一×1瓶，4℃保存；

试剂二×1瓶，4℃保存；

试剂三×1瓶，4℃保存；

粗酶液提取：

1、收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

2、称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至525nm，蒸馏水调零。

2、样本测定（在EP管中依次加入下列试剂）

试剂名称（μL）	测定管	对照管
试剂一	200	100
试剂二	50	50
样本	50
煮沸的样本		50

37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）中准确水浴10min后，迅速放入冰浴中冷却

试剂三

100

充分混匀，5000g，常温离心10min，收集上清，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，525nm处检测测定管和对照管吸光度，计算ΔA=A测定-A对照。
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